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    簡述器官芯片的使用指南

    更新時間:2025-06-25      點擊次數:198
      一、器官芯片的基本組成:
      1.芯片結構
      微流控控系統:包含微通道、腔室和閥門,用于細胞培養和流體控制。
      細胞培養區域:通常由水凝膠、基質膠或納米材料構成,模擬器官的三維微環境。
      傳感器與檢測模塊:集成電極、光學探頭或生化傳感器,實時監測細胞活性、代謝產物等。
      2.配套設備
      注射泵或壓力控制器:用于精確調控流體流動。
      顯微鏡或成像系統:觀察細胞形態和動態變化。
      數據采集與分析軟件:記錄實驗參數(如流速、溫度、pH值等)。
      二、器官芯片使用前準備:
      1.芯片檢查與預處理
      檢查芯片是否完好,無裂紋或污染。
      用70%乙醇或無菌水清洗芯片表面,紫外照射滅菌30分鐘。
      若需包被基底膜,按說明書處理培養區域。
      2.細胞準備
      選擇符合實驗需求的細胞類型。
      調整細胞密度至適宜濃度,懸浮于培養基中。
      若需共培養,提前混合不同細胞類型。
      3.培養基與試劑
      使用無菌、無酚紅的培養基,并添加生長因子或激素。
      預溫培養基至37℃,避免溫度波動影響細胞活性。
      三、器官芯片操作流程:
      1. 細胞接種
      加載細胞:
      通過注射泵或移液槍將細胞懸液緩慢注入芯片的腔室,避免產生氣泡。
      對于動態灌流模型,需確保細胞在微通道中均勻分布。
      固化細胞:
      若使用水凝膠,需通過離子交換或溫度控制使其交聯。
      靜置30-60分鐘,讓細胞貼壁。
      2. 流體灌注與參數設置
      連接流體系統:
      將芯片進出口與注射泵、儲液器連接,確保密封性。
      設置流速,模擬毛細血管血流速度。
      環境控制:
      將芯片置于37℃、5% CO2培養箱中,或使用恒溫加熱板維持溫度。
      定期更換儲液器中的新鮮培養基,避免代謝廢物積累。
      3. 功能驗證與實驗干預
      生理功能檢測:
      通過傳感器監測細胞代謝。
      用熒光染料評估細胞活力,或用TUNEL染色檢測凋亡。
      實驗干預:
      添加藥物、毒素或病原體,觀察器官反應。
      調整流速或施加機械刺激(如剪切力),模擬病理狀態。
      4. 數據記錄與分析
      實時監測:
      使用成像系統記錄細胞形態變化。
      通過電化學傳感器檢測離子濃度。
      樣本采集:
      從出口收集灌流液,用于ELISA、質譜或測序分析。
      固定芯片后切片,進行免疫熒光染色或RNA提取。
     

     

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